Hai loại enzyme lipase (CALB và RML) được cố định lên silica epoxy nhằm tăng độ bền và khả năng tái sử dụng.

• Dầu ăn thải có hàm lượng acid béo tự do cao (38%) được sử dụng làm nguyên liệu đầu vào.
• - Phản ứng transesterification được thực hiện với methanol trong môi trường có t-butanol và chất hấp thụ nước (silica gel xanh).
• - Phương pháp RSM với thiết kế CCD được sử dụng để khảo sát ảnh hưởng của 4 yếu tố: tỉ lệ enzyme CALB:RML, lượng t-butanol, lượng chất hấp thụ nước và thời gian phản ứng.
• - Mô hình hồi quy bậc hai cho thấy các yếu tố CALB:RML (3:1), t-butanol (10%), chất hấp thụ nước (22.5%) và thời gian phản ứng (10 giờ) cho hiệu suất biodiesel cao nhất (91.5%).
• - So với các enzyme thương mại, hệ enzyme cố định này có chi phí thấp hơn và khả năng tái sử dụng cao (giữ 93% hoạt tính sau 14 chu kỳ).