Sản xuất nấm men: nhân nuôi P. guilliermondii 5A và C. oleophila 13L qua hệ thống lên men nhiều cấp (5 L → 75 L → 500 L) trên môi trường tối thiểu bổ sung vi lượng, thu sinh khối, rửa, đông khô.  

Tạo viên gel: huyền phù nấm men đông khô (200 g/L) trộn dung dịch Na-alginate 1–3% (pH 4,5), nhỏ giọt vào CaCl₂ 0,2 M tạo gel (Ø 3–5 mm), rửa vô trùng.  

Đặc tính gel: đo khả năng hút nước (WU%) trong đệm Tris–HCl 37 °C; quan sát SEM phân bố và hình thái tế bào; định lượng CFU/mL định kỳ; kiểm tra nhiễm khuẩn; định danh chủng (Biolog, 26S rRNA).  

Bảo quản: theo dõi đến 14 tháng ở 0, 4, 15 °C. Kết quả: gel 3% ở 4 °C giữ hình thái, mật độ cao hơn so với 1–2% hoặc nhiệt độ khác; gel 1% cấu trúc xốp, tế bào phân bố thưa. Viên gel không nhiễm vi khuẩn, nấm sợi trong suốt thí nghiệm.  

Hoạt tính đối kháng: cam Valencia late, chanh Femminello xử lý nhúng huyền phù viên gel (TH1–TH3) hoặc nấm men đông khô (THLY) 72 h trước khi gây nhiễm P. digitatum (10⁵ bào tử/mL). Sau 6 ngày ủ 25 °C, ẩm 90%, tính % ức chế (DI%). Gel 3% bảo quản 4 °C 14 tháng đạt DI >60%, tương quan thuận mạnh (r ≥ +0,75) giữa Na-alginate%, CFU và DI. SEM vết thương cam cho thấy tế bào nấm men phủ bề mặt, cạnh tranh không gian dinh dưỡng với bào tử mốc.  

Kết luận: Viên gel Na-alginate 3% bảo quản 4 °C bảo toàn mật độ, hình thái và hiệu quả đối kháng của nấm men đông khô trên quả có múi >1 năm, là giải pháp đơn giản, chi phí thấp, thân thiện môi trường thay thế thuốc trừ nấm tổng hợp.