Nguyên liệu: táo Royal Gala (tối ưu phương pháp), sau đó áp dụng cho 4 giống (Royal Gala, Granny Smith, Cripps Pink, Red Delicious); mua tại chợ địa phương Santa Maria, Brazil.  

Chuẩn bị mẫu: gọt vỏ 10 quả vùng xích đạo, cắt miếng 1 cm², lấy 10 mảnh/ống 50 mL, bảo quản −30 °C. Thêm 5 mL nước cất, đồng nhất hóa (ultraturrax 24.000 rpm, 30 s), thêm dung môi chiết & phân tán, lắc ngang 30 phút, ly tâm 1083×g 5 phút, thu pha hữu cơ.  

Tối ưu:  

• Dung môi chiết: chloroform cho hiệu suất cao nhất (~100% sau 13 bước), toluen, isooctane, hexane kém hơn; dichloromethane không tạo hai pha.  
• - Dung môi phân tán: acetone > acetonitrile > methanol.  
• - Lực ion: NaCl tăng hiệu suất nhưng cuốn tạp; không thêm muối và dùng lắc ngang cho RSD tốt nhất; siêu âm không cải thiện.  
• - Thể tích: tối ưu 2 mL chloroform (lần 1) + 4 mL acetone, sau đó 2 lần 1 mL chloroform. Không cần tiền nghiền ultraturrax.  
• Đặc trưng sáp:  
• - Phân đoạn 1 (FA): methyl hóa, GC-FID định lượng C6:0–C22:2; acid béo bão hòa và không bão hòa, chủ yếu C16:0, C18:2n6, C18:1n9, C18:0.  
• - Phân đoạn 2 (hữu cơ đậm đặc): GC-FID/MS định lượng hydrocarbon (nonacosane, pentacosane), alcohol, aldehyde, ester, terpen (α-farnesene).  
• - Phân đoạn 3 (hợp chất nhiệt độ sôi cao): dẫn xuất MTBSTFA, GC-FID/MS định lượng acid triterpene (ursolic, oleanolic), sterol (β-sitosterol), acid mandelic, propionate, ester sáp.  
• Kết quả:  
• - RSD tổng lượng sáp ≤2,81% (Royal Gala, n=10), các giống khác ≤~12,6% (n=5).  
• - Thành phần chính: acid béo, nonacosane, acid ursolic; khác biệt giống: Granny Smith giàu alkane dài và FA không bão hòa (C20:3n6, C18:3n3, C22:2), Royal Gala giàu triterpene, alcohol, ester; Pink Lady® nhiều C16:0, C20:3n6, pentacosane; Red Delicious giàu mandelic acid, β-sitosterol.  
• - PCA tách biệt giống theo thành phần sáp. Pink Lady® có hàm lượng sáp cao nhất (~2185 µg/cm²), Royal Gala thấp hơn (~1612 µg/cm²).