Ảnh hưởng của nhiễm Penicillium đến biểu hiện và hoạt tính của CDPK2 ở dưa Hami sau thu hoạch xử lý bằng canxi clorua

( 0 đánh giá )
Miễn phí

Dưa Hami được xử lý ngâm CaCl₂ 0; 0,08; 0,16; 0,24 M trong 10 phút, đục lỗ cấy nước hoặc huyền phù bào tử P. crustosum (10⁵ bào tử/mL). Lấy mẫu vùng quanh lỗ ở 0–84h để phân tích hoạt tính CDPK (ELISA), tách RNA–tổng hợp cDNA, nhân bản và giải trình tự HmCDPK2, dự đoán cấu trúc bằng SOPMA và SWISS-MODEL, định lượng biểu hiện bằng qRT-PCR (chuẩn hóa theo GAPDH). HmCDPK2 dài 1635 bp, ORF 1239 bp, mã hóa protein 46,16 kDa, pI lý thuyết 5,00, có miền biến thiên N, miền kinase, miền nối, 4 miền gắn Ca²⁺ kiểu calmodulin; cấu trúc bậc hai gồm 53,16% alpha-helix, mô hình 3D tương đồng 41,11% với CDPK Plasmodium berghei (PDB 3Q5I). Hoạt tính CDPK ở cả hai nhóm tăng nhanh, đạt đỉnh 12h rồi giảm; nhóm nhiễm luôn cao hơn có ý nghĩa thống kê. Biểu hiện HmCDPK2 tương quan thuận với hoạt tính enzyme, cao nhất ở 0,16 M Ca²⁺, thấp ở 0,24 M (có thể do mất cân bằng ion). Cơ chế phản ứng: sau nhiễm, Ca²⁺ ngoại sinh phù hợp thúc đẩy dòng Ca²⁺ nội bào, hoạt hóa CDPK, cùng MAPK điều hòa yếu tố phiên mã và gen phòng vệ, giúp tăng sức kháng bệnh trong giai đoạn đầu.