Virus IHNV tái tổ hợp biểu hiện protein VP2 của virus IPNV tạo miễn dịch bảo vệ kép chống lại cả hai mầm bệnh ở cá hồi vân

( 0 đánh giá )
Miễn phí

IHNV là virus RNA sợi đơn âm, gây hoại tử mô tạo máu với tỷ lệ chết lên đến 100%; IPNV là virus RNA sợi đôi, gây hoại tử tụy với tỷ lệ chết đến 70%; VP2 là kháng nguyên chính của IPNV, chứa các epitope trung hòa; VP2COE là đoạn VP2 rút gọn từ aa146–350 chứa vùng biến đổi trung tâm; gen NV của IHNV được thay bằng VP2 hoặc VP2COE để tạo virus tái tổ hợp; các plasmid pIHNV-VP2 và pIHNV-VP2COE được tạo bằng enzyme NdeI và SpeI; virus được phục hồi bằng cách đồng chuyển nạp vào tế bào EPC cùng các plasmid hỗ trợ; virus tái tổ hợp có thể nhân lên ổn định qua 20 thế hệ; RT-PCR và enzyme SnaB I/Spe I xác nhận dấu hiệu di truyền đặc trưng; Western blot cho thấy VP2 (55 kDa) và VP2COE (23 kDa) được biểu hiện rõ; TEM cho thấy virus có hình viên đạn ~80×160 nm; đường cong tăng trưởng cho thấy virus tái tổ hợp có tốc độ nhân lên thấp hơn IHNV gốc do mất gen NV; thử nghiệm gây bệnh cho thấy virus tái tổ hợp giảm độc lực rõ rệt (CPM 5% so với 90% của IHNV gốc); tỷ lệ sống sau thử thách với IHNV và IPNV đạt 50–65%; ELISA cho thấy kháng thể IgM đặc hiệu tăng từ ngày 28 đến 63 sau tiêm chủng; không có khác biệt đáng kể giữa hai chủng VP2 và VP2COE về hiệu quả bảo vệ; nghiên cứu khẳng định khả năng sử dụng IHNV làm nền tảng vaccine đa giá mang kháng nguyên từ các virus khác.