E. coli được biến nạp plasmid pRSFDuet mang gen TLL, biểu hiện enzyme nội bào có hoạt tính cao (12.2 U/g cdw).

• Tế bào ướt chứa 84% nước, sử dụng trực tiếp làm xúc tác mà không cần sấy khô.
• - Mỡ thải từ Singapore (21.1% FFA) và Malaysia (9.8% FFA) đều được chuyển hóa thành FAME với hiệu suất 99% và 97%.
• - Tối ưu hóa: 31 wt% tế bào ướt (tương đương 5 wt% cdw), 26 wt% nước, tỷ lệ mol methanol/grease 4:1, bổ sung methanol theo từng bước (0, 1, 2, 4 giờ).
• - Phản ứng ester hóa FFA nhanh hơn transester hóa triglyceride; FAME không bị thủy phân đáng kể.
• - Tế bào ướt có thể tái sử dụng 5 lần, hiệu suất còn 55% ở chu kỳ thứ 5.
• - Quy trình có thể mở rộng quy mô (5 g, 50 g, 150 g mỡ thải), hiệu suất thu hồi FAME >90%.
• - So sánh với các chủng khác (E. coli biểu hiện CALB/TLL, SML), chủng TLL cho hiệu suất cao nhất.
• - Phân tích sản phẩm: FAME, glyceride, FFA bằng GC; không cần dung môi hữu cơ, quy trình xanh, đơn giản.