Quy trình chỉnh sửa gen có mục tiêu bằng hệ thống CRISPR-Cas9 trên rầy mềm đậu Hà Lan

( 0 đánh giá )
Miễn phí

Stylin-01 là gen mã hóa protein biểu mô ở đầu rầy, có vai trò tiềm năng trong truyền virus thực vật.

  • Quy trình gồm 7 bước: cảm ứng sinh sản hữu tính, giao phối, tiêm CRISPR-Cas9 vào trứng, ủ đông trứng (diapause), nở, duy trì dòng, và kiểm tra đột biến.
  • - Tỷ lệ trứng sống sau tiêm đạt 20–45%, tỷ lệ đột biến trong trứng trước khi ủ đông đạt 70–80%.
  • - Sau 3 tháng ủ đông, tỷ lệ nở của trứng tiêm dao động từ 1–11% tùy dòng lai.
  • - Tổng cộng 17 dòng rầy được duy trì, trong đó 6 dòng có đột biến tại vị trí mục tiêu, gồm 2 dòng đột biến cả hai allele và 4 dòng đột biến một allele.
  • - Tỷ lệ truyền gen dòng mầm đạt khoảng 35%, cho thấy hiệu quả của phương pháp chỉnh sửa gen này trên rầy mềm.