Phát hiện nhanh và nhạy Enterocytozoon hepatopenaei ở tôm bằng kỹ thuật real-time LAMP

( 0 đánh giá )
Miễn phí

EHP là vi sinh vật nội bào gây bệnh HPM ở tôm, đặc biệt là P. vannamei và P. monodon, ảnh hưởng đến tăng trưởng và gây thiệt hại kinh tế  

Phương pháp real-time LAMP được tối ưu ở 68 ℃, cho kết quả khuếch đại trong vòng 8 phút, hoàn tất sau 38 phút 38 giây  

Không phản ứng chéo với các mầm bệnh khác như WSSV, IMNV, Vibrio penaeicida, Microsporidium seriolae  

Độ nhạy:  

– Real-time LAMP phát hiện DNA ở nồng độ 10⁻¹ đến 10⁻³  

– Real-time PCR: 10⁻³  

– Nested PCR: 10⁰ đến 10⁻²  

→ Real-time LAMP nhạy hơn nested PCR 100 lần  

Phản ứng LAMP tạo độ đục do magnesium pyrophosphate, có thể quan sát bằng mắt thường  

Định lượng DNA bằng biểu đồ chuẩn từ plasmid EHP (10⁹ bản sao/μL), hệ số tương quan R² = 0.9941  

Phương pháp này đơn giản, tiết kiệm chi phí, không cần thiết bị đắt tiền như real-time PCR  

Thích hợp để áp dụng tại hiện trường, hỗ trợ giám sát dịch bệnh và kiểm soát EHP trong nuôi tôm