Chlorella biến đổi gen mang Scy-hepc giúp tăng khả năng sống sót của cá Sparus macrocephalus và cá song lai khi bị nhiễm Aeromonas hydrophila

( 0 đánh giá )
Miễn phí

– Scy-hepc là peptide tổ hợp từ scygonadin (309 bp) và hepcidin (183 bp), có phổ kháng khuẩn rộng  

– Gen Scy-hepc được chèn vào vector biểu hiện pMDC85, có gắn GFP và His-tag, dưới promoter 2x35S CaMV  

– Chuyển gen vào Chlorella sp. bằng điện biến nạp sau khi tạo protoplast  

– Chọn lọc bằng kháng sinh hygromycin B (500 µg/mL) → tạo dòng Q5 ổn định  

– Xác nhận biểu hiện gen bằng PCR, kính hiển vi huỳnh quang (GFP), và western blot (Scy-hepc ~52 kDa)  

– Protein Scy-hepc từ Chlorella có hoạt tính kháng khuẩn mạnh với A. hydrophila (vùng ức chế ~3 mm)  

– Thử nghiệm in vivo:  

   + Cá Sparus macrocephalus: tỷ lệ sống 80 ± 10% (Chlorella biến đổi gen) vs 33.33 ± 11.55% (Chlorella thường) sau 72h  

   + Cá song lai: tỷ lệ sống 55 ± 5% vs 25 ± 5% sau 36h  

– Chlorella biến đổi gen là hệ thống chuyển giao peptide kháng khuẩn hiệu quả, an toàn, chi phí thấp  

– GFP giúp theo dõi biểu hiện gen dễ dàng, phát huỳnh quang xanh rõ rệt sau 60 ngày nuôi  

– Tỷ lệ biểu hiện protein Scy-hepc trong tổng protein hòa tan ~0.052–0.078%